Mizuno, M., & Kawakami, S. (2006). An immunomodulating polysaccharide in Agaricus brasiliensis S. Wasser et al.(Agaricomycetideae) activates macrophages through toll-like receptor 4. International Journal of Medicinal Mushrooms, 8(3).
Se estimularon macrófagos peritoneales de ratones con receptor toll-like (TLR) 4 y TLR2 knockout (TLR4 – / – y TLR2 – / -) con un heteroglicano insoluble en agua (ABHG), purificado de un cuerpo frutal de Agaricus brasiliensis.
Los ratones TLR4 – / – no produjeron factor de necrosis tumoral (TNF) -α ni óxido nítrico (NO), pero TLR2 – / – sí. Sin embargo, ABHG no inhibió la producción de TNF-α y NO por los macrófagos en presencia de polimixina B, que podría unirse al lípido A en el lipopolisacárido (LPS); sugiriendo que ABHG no contenía LPS como contaminantes.
Estos resultados indicaron que ABHG fue reconocido a través de TLR4 – / – para producir citocinas inflamatorias como TNF-α y NO. Se utilizó RT-PCR para investigar el efecto de ABHG en la expresión de ARNm de TNF-α y óxido nítrico sintasa inducible (iNOS) en RAW 264.7. La expresión de ARNm de TNF-α se indujo 0,5 horas después de la estimulación, alcanzó su punto máximo en 3 horas y luego disminuyó para alcanzar un nivel estable después de 24 horas.
Por otro lado, la inducción de ARNm de iNOS se retrasó durante 3 horas y, posteriormente, se mantuvo en el mismo nivel hasta 24 horas después de la estimulación. Además, la actividad de unión al ADN de NF-κB se observó tan pronto como 0,5 horas después del tratamiento y aumentó rápidamente a su valor máximo 2 horas después, y luego disminuyó. Cuando se estimuló RAW 264.7 con ABHG en presencia de un anticuerpo anti-TNF-α, la expresión del ARNm de TNF-α no se vio afectada y la iNOS se reguló negativamente.
Estos resultados indican que la producción de TNF-α por RAW 264.7, estimulada con un polisacárido inmunomodulador como ABHG, se incrementó mediante la regulación al alza de NF-κB a través de TLR4, y el TNF-α recién producido mejoró la producción de NO a través de una vía autocrina.