Lin, Y. P., Thibodeaux, C. H., Peña, J. A., Ferry, G. D., & Versalovic, J. (2008). Probiotic Lactobacillus reuteri suppress proinflammatory cytokines via c-Jun. Inflammatory bowel diseases, 14(8), 1068-1083.
FONDO: Se exploraron las capacidades inmunorreguladoras diferenciales del probiótico Lactobacillus en el contexto de la enfermedad de Crohn pediátrica. Las estrategias experimentales abordaron los mecanismos moleculares de la supresión del factor de necrosis tumoral (TNF) en macrófagos activados mediante regulación transcripcional.
METODOS: Los factores secretados producidos por cepas probióticas de Lactobacillus reuteri se cosecharon y probaron con monocitos y macrófagos humanos. Se utilizaron inmunoensayos cuantitativos y la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (RT-PCR) en tiempo real para examinar las cantidades relativas de citoquinas humanas y ARNm de TNF, respectivamente, y los ensayos informadores evaluaron la regulación transcripcional de TNF por probióticos. Las macromatrices de proteínas de ADN cuestionaron los efectos mediados por probióticos en la activación del factor de transcripción. Finalmente, los ensayos inmunoabsorbentes ligados a enzimas (ELISA) y las inmunotransferencias examinaron la participación del factor de transcripción específico AP-1 y sus componentes.
RESULTADOS: La cepa probiótica L. reuteri ATCC PTA 6475 demostró la capacidad de suprimir de forma potente la producción de TNF humano por monocitos activados por lipopolisacáridos y macrófagos primarios derivados de monocitos de niños con enfermedad de Crohn. Las cantidades de la quimiocina MCP-1/CCL2 también se redujeron con la cepa probiótica L. reuteri ATCC PTA 6475 en macrófagos de niños en remisión. Los ensayos de indicador de luciferasa y RT-PCR cuantitativa en tiempo real mostraron que la regulación transcripcional del TNF humano era un mecanismo principal de la inmunomodulación mediada por probióticos. El probiótico L. reuteri suprimió la transcripción de TNF al inhibir la activación de c-Jun regulado por MAP quinasa y el factor de transcripción AP-1.
CONCLUSIONES: La supresión de TNF humano y MCP-1 por el probiótico L. reuteri dependía de la cepa, y la activación de c-Jun y AP-1 representan objetivos principales para la supresión de la transcripción de TNF mediada por probióticos. Este informe enfatiza la naturaleza clonal de la inmunoprobiosis y la descripción de un mecanismo inmunomodulador específico para la selección de cepas probióticas en futuros ensayos clínicos orientados a la enfermedad inflamatoria intestinal.